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  杭州森尼欧为您提供液相色谱维护知识

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一、混合溶剂必须要过滤以后才能混合，万一要混合后过滤的话，只能用有机的，不能用水系的。因为水系的材料是纤维素，有机相回或多或少的溶解一点纤维素的，造成污染。

二、标样或样品用流动相溶解（排除特殊情况），可以避免很多麻烦。

三、给色谱柱加温，温度升高的目的，部分在于增加溶质的溶解度，但更重要的是降低溶剂的黏度，从而改进峰形和分离度。注意：温度升高会降低保留时间，这对分离度也有影响，温度的变化对谱带宽度的影响甚大，而塔板高度受温度的影响虽然也取决于所采用的色谱类型，而温度升高总是要降低塔板高度的。

四、C18柱的柱温一般不要超过40摄氏度，否则健合相容易脱落的。

五、进样器使用，除每次用水清洗外，隔一段时间后，用甲醇或乙腈反复吸取，清洗一下。

六、用HPLC进行分析时保留时间有时发生漂移，有时发生快速变化，原因何在?如何解决?

答：关于漂移问题：

1、温度控制不好，解决方法是采用恒温装置，保持柱温恒定

2、流动相发生变化，解决办法是防止流动相发生蒸发、反应等

3、柱子未平衡好，需对柱子进行更长时间的平衡

七、关于快速变化问题：

1、流速发生变化，解决办法是重新设定流速，使之保持稳定

2、泵中有气泡，可通过排气等操作将气泡赶出。

3、流动相不合适，解决办法为改换流动相或使流动相在控制室内进行适当混合

八、液相色谱中峰出现拖尾或出现双峰的原因是什么?

1、筛板堵塞或柱失效，解决办法是反向冲洗柱子，替换筛板或更换柱子。

2、存在干扰峰，解决办法为使用较长的柱子，改换流动相或更换选择性好的柱子

九、毛细管色谱分流进样时，非线性分流的主要原因是什么?

1、进样器温度太低，样品汽化不*，发生分级分流。

2、进样器温度太高，某些组分可能发生热分解，也有的样品可能发生催化分解，或样品部分地被吸附在进样器内表面上。

3、在分流点以前样品没有混合均匀或混合不充分。

4、系统的进样垫，柱接头等地方漏气。

十、做液相色谱分析时，柱压不稳定，原因何在?如何解决?

答：原因可能有：

1、泵内有空气，解决的办法是清除泵内空气，对溶剂进行脱气处理;

2、比例阀失效，更换比例阀即可。

3、泵密封垫损坏，更换密封垫即可。

4、溶剂中的气泡，解决的办法是对溶剂脱气，必要时改变脱气方法;

5、系统检漏，找出漏点，密封即可。

6、梯度洗脱，这时压力波动是正常的。

十一、做PGS/MS分析时，如何防止焦油状污染物进入毛细柱?

答：聚合物，尤其是一些含氮、硫及卤素的高分子裂解时，常有焦油状物质产生。为防止这种焦油状物质进入毛细柱造成污染而使柱性能下降，可采用保护预柱，即在裂解器与毛细柱之间接一填充预柱，通过控制预柱温度而使焦油状物质滞留在预柱内，预注可置于GC气化室内，这样既容易控制温度，又减少系统的死体积，当然，预柱填料需经常更换。

十二、我zui近更换了另一种牌号的ODS柱，虽然分离情况仍可以，但保留时间不能重现，为什么?

答：这是因为被分析物可能具有形成氢健的能力。液相色谱仪尽管过去几年来，填料的制造技术有了极大的提高，但不同的厂商的ODS填料表面硅醇基的浓度不同。正是这些硅醇基可能与样品发生相互作用。因此，同一被分析物中的各组分在不同牌号的ODS柱上的相对保留时间就可能不同。在流动相中加入少量竞争物，如三乙基胺（TEA），将会使硅醇基的成键能力饱和，从而保证不同牌号柱子上的相对保留时间具有较好的重现性。

十三、高温毛细柱的使用寿命一般为多长?

答：毛细柱寿命除决定于柱子本身的性能外，在很大程度上取决于使用情况，比如使用温度、样品状态，进样量等，如果在其使用温度范围内，样品干净，色谱柱不被污染的情况下，柱子寿命一般在2—3年之间。

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